期刊简介

  本刊是天津医科大学主办的大型综合性学术期刊,是国内外公开发行刊物,国内统一刊号:CN12-1259/R,国际标准连续出版物号:ISSN1006-8147。刊期:季刊,页码:128页(8个印张)。主要栏目有基础医学论著、临床医学论著、报道与交流、个例报告、护理医学、医学综述、医学教育研究等10个栏目。读者对象:医学院校的教师和科研人员,医学教育管理人员,临床教师和科研人员以及中级以上的医护人员等。


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  • 杂志名称:天津医科大学学报杂志
  • 主管单位:天津市教育委员会
  • 主办单位:天津医科大学
  • 国际刊号:1006-8147
  • 国内刊号:12-1259/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:1999年被评为天津市高校学报一等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏
天津医科大学学报杂志2015年第03期

不同固定剂及渗透方法对免疫荧光技术中EGFR内吞转运观察效果的影响

冯婧文;杨少斌;王兆松;赵文铖;肖春花

关键词:细胞免疫荧光, 固定剂, 渗透剂, 荧光显微镜, 表皮生长因子受体
摘要:目的:探索适合表皮生长因子受体(EGFR)内吞转运免疫荧光观察的固定和渗透方法。方法:采用OLYMPUS BX61荧光显微镜及成像系统,对不同固定剂(4%多聚甲醛,甲醇,4%多聚甲醛+甲醇,丙酮,丙酮与甲醇体积比1∶1的混合液)配合不同渗透方法(0.04%saponin,0.1%TritonX-100)得到的EGF刺激后0 min和15 min两个时间点的EGFR免疫荧光图像进行对比分析。结果:0 min时EGFR主要定位于细胞质膜,4%多聚甲醛+甲醇的固定方法,配合使用0.04%saponin,可以观察到细胞膜上明显、清晰、连续的EGFR信号。针对EGF刺激15 min后内吞进入细胞的EGFR,不同固定方法对观察效果没有明显影响。但与配合使用0.04%saponin相比,0.1%TritonX-100进行渗透能充分暴露EGFR在细胞核内的信号。结论:温和的固定和渗透方法可获得较好的EGFR膜定位信号。针对内吞转运中的EGFR需要较强的渗透剂,以确定EGFR在细胞内准确的定位。