期刊简介
本刊是天津医科大学主办的大型综合性学术期刊，是国内外公开发行刊物，国内统一刊号：CN12-1259/R，国际标准连续出版物号：ISSN1006-8147。刊期：季刊，页码：128页(8个印张)。主要栏目有基础医学论著、临床医学论著、报道与交流、个例报告、护理医学、医学综述、医学教育研究等10个栏目。读者对象：医学院校的教师和科研人员，医学教育管理人员，临床教师和科研人员以及中级以上的医护人员等。
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- 杂志名称：天津医科大学学报杂志
- 主管单位：天津市教育委员会
- 主办单位：天津医科大学
- 国际刊号：1006-8147
- 国内刊号：12-1259/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：1999年被评为天津市高校学报一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏
体外构建合成成纤维细胞生长因子-1 mRNA及其表达的初步研究
吴志敏；李光明；白洁；王金鑫；贾欣雨；杜晓玲；朱泽
关键词：体外转录, mRNA稳定性, 成纤维细胞生长因子-1, 体内表达
摘要：目的:参照mRNA稳定性理论,设计并体外转录合成具有一定稳定性的FGF1 mRNA,对其表达进行初步验证. 方法:在pT7TS载体上加poly A、βglobin 3′、5′UTR,增加GC含量优化设计FGF1序列,并结合mRNA二级结构分析其稳定性,目的序列琼脂糖凝胶电泳及测序验证后, 体外转录合成FGF1 mRNA, 待浓度及片段大小验证后, 行动物实验, 通过ELISA法检测FGF1 mRNA表达. 结果:二级结构分析显示,优化后FGF1序列稳定性更高;双酶切后琼脂糖凝胶电泳显示pT7TS-FGF1重组载体构建成功,测序验证正确;聚丙烯酰胺凝胶电泳显示合成mRNA大小正确. ELISA检测显示,实验组(92.48 pg/mL)小鼠血清中FGF1蛋白含量较对照组(13.59 pg/mL和15.54 pg/mL)明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);对照组间FGF1蛋白含量接近,二者无统计学差别(P>0.05). 结论:成功构建并体外转录合成稳定的FGF1 mRNA,mRNA与鱼精蛋白结合后回输小鼠在体内成功表达.
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