期刊简介
本刊是天津医科大学主办的大型综合性学术期刊，是国内外公开发行刊物，国内统一刊号：CN12-1259/R，国际标准连续出版物号：ISSN1006-8147。刊期：季刊，页码：128页(8个印张)。主要栏目有基础医学论著、临床医学论著、报道与交流、个例报告、护理医学、医学综述、医学教育研究等10个栏目。读者对象：医学院校的教师和科研人员，医学教育管理人员，临床教师和科研人员以及中级以上的医护人员等。
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- 杂志名称：天津医科大学学报杂志
- 主管单位：天津市教育委员会
- 主办单位：天津医科大学
- 国际刊号：1006-8147
- 国内刊号：12-1259/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：1999年被评为天津市高校学报一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏
慢病毒载体介导的RNAi双敲除ABCG2和UGT1A1的Caco-2细胞模型
龚淑敏；李光明；董莉真；吴志敏；程彬；张斌；朱泽
关键词：慢病毒载体, ABCG2, UGT1A1, Caco-2细胞, RNAi
摘要：目的:构建以Caco-2细胞为研究对象,由慢病毒载体介导ABCG2和UGT1A1基因RNAi干扰的肠道药物吸收和代谢模型.方法:应用慢病毒载体介导的RNAi技术敲除Caco-2细胞的ABCG2和UGT1A1基因,构建双RNAi干扰ABCG2和UGT1A1的Caco-2细胞系.应用RT-PCR,Real-time PCR,Western blotting等方法检测ABCG2和UGT1A1在mRNA及蛋白水平的表达.然后选择干扰高表达细胞株,连续传代监测干扰相应干扰基因的表达变化.结果:成功构建了慢病毒载体介导的RNAi双干扰Caco-2细胞模型,慢病毒ABCG2和UGT1A1单基因干扰效率分别为75％和88％；分组先RNAiABCG2后RNAiUGT1A1的双基因RNAi干扰效率分别为72.3％和85.7％；分组先RNAi UGT1A1后RNAi ABCG2的双基因干扰效率分别为69.7％和88.7％; ABCG2与UGT1A1基因的RNAi干扰先后顺序与终双干扰效果无显著性差异(P＞0.05).Western blotting方法验证ABCG2与UGT1A1的蛋白水平表达也分别相应地明显减少.结论:第一次应用慢病毒载体在Caco-2细胞上同时干扰ABCG2和UGT1A1基因表达.为研究肠道中ABCG2和UGT1A1对口服药物或外源化合物吸收和代谢的联合作用提供可靠细胞模型.
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