期刊简介

  本刊是天津医科大学主办的大型综合性学术期刊,是国内外公开发行刊物,国内统一刊号:CN12-1259/R,国际标准连续出版物号:ISSN1006-8147。刊期:季刊,页码:128页(8个印张)。主要栏目有基础医学论著、临床医学论著、报道与交流、个例报告、护理医学、医学综述、医学教育研究等10个栏目。读者对象:医学院校的教师和科研人员,医学教育管理人员,临床教师和科研人员以及中级以上的医护人员等。


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  • 杂志名称:天津医科大学学报杂志
  • 主管单位:天津市教育委员会
  • 主办单位:天津医科大学
  • 国际刊号:1006-8147
  • 国内刊号:12-1259/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:1999年被评为天津市高校学报一等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏
天津医科大学学报杂志2007年第02期

稳定表达突变减毒志贺样毒素Ⅰ的CHO细胞株的建立与鉴定

魏枫;任秀宝;于津浦;蒋华蔚;付晓达;郝希山

关键词:志贺样毒素, 转染, CHO细胞, 真核表达
摘要:目的:建立稳定表达突变减毒志贺样毒素Ⅰ(Stx1)的CHO细胞株.方法:用脂质体介导将突变减毒Stx1真核表达载体pcDNA3.1-Stx1D10、pcDNA3.1-Stx1D100转染中国仓鼠卵巢细胞系CHO,G418筛选抗性克隆,PCR、RT-PCR、Western blot等方法检测阳性细胞株,有限稀释法获得稳定表达突变减毒Stx1的CHO细胞株.检测阳性细胞株的培养上清对人卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制作用,并使用Stx1 B亚基抗体对该作用进行阻断.结果:经2次克隆化获得稳定表达突变减毒Stx1的基因工程细胞株,Western blot检测和SKOV3细胞生长抑制实验证实该细胞株可以分泌突变减毒Stx1,该毒素对SKOV3细胞具有生长抑制作用且该作用可以被Stx1 B亚基抗体阻断.结论:成功地建立了分泌性表达突变减毒Stx1的CHO细胞株,命名为CHO/Stx1D10和CHO/Stx1D100.证实Stx1的天然信号肽可以被真核细胞识别从而使其被真核细胞分泌性表达.